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普通光學顯微鏡拍攝小型昆蟲

發布時間:2020/11/17

通常觀察昆蟲的形態結構使用的是體視顯微鏡體視顯微鏡又稱實體顯微鏡,由于采用雙通道光路,雙目鏡筒中的左右兩光束具有一定的夾角,即體視角(一般為12 °-15°),因而能形成三維空間的立體圖像,具有立體感強、成像清晰寬闊(景深大)、長工作距離(通常為110mm,便于解剖操作)同時可連續放大觀看樣品。生物學上體視顯微鏡常用于解剖過程中的實時觀察。在觀察小型昆蟲(3mm以下,蟲體不透明)時,由 于解剖鏡放大倍率一般在8-100倍之間,常常無法看清昆蟲一些細微結構,而普通生物顯微鏡一般有多個鏡頭可更換,放大倍率50-1000倍左右,大大提高了分辨率。作者通過對普通光學顯微鏡的光路的改變,以及景深擴展軟件的配套應用,使利用普通光學顯微鏡就能拍攝到高清、立體小型昆蟲圖像的愿望成為現實。現將方法介紹如下:



1、改變光路

     普通光學顯微鏡的光源一般設在載物臺下方的底座上,為透射光路l2 J,光從下方透射穿過觀察物進入物鏡,因此,普通光學顯微鏡的鏡檢對象必須是透明的,且制作成裝片后 方可放在載物臺上觀察。當鏡檢的對象不透明時,必須改變光路,關閉普通光學顯微鏡原有的光源,或用卡紙擋住普通光學顯微鏡原有的采光系統, 取而代之,在鏡檢對象上方添加新的照明光源。可以自 制小型冷陰極環形照明燈,通過旋鈕套扣在物鏡上,使光線從上方透射到鏡檢對象上,從而使不透明的鏡檢物也可以在普通光學顯微鏡上觀察。不足之處:(1)不能連續變倍觀察,需要通過更換物鏡鏡頭,方可改變放大倍率,此時,必須先將套扣在物鏡上外接光源卸下,才可以更換物鏡;(2)物鏡與鏡檢對象之間的距離很短(小于10mm),往往不便進行復雜的解剖操作。

2、分層拍攝

     使用光學顯微鏡觀察昆蟲標本時,因昆蟲是立體的,往往都超出了顯微鏡的景深范圍(約1-100μm),這時獲取到的昆蟲圖片就只能是局部清晰的,該如何去解決呢?首先通過調節顯微鏡達到樣品的不同聚焦層面(這里注意調焦步距要小于景深,若大于景深就會有信息遺失),然后將所有這些層面的圖像用數碼成像設備拍攝并傳輸到計算機(這些層面圖像中的每一幅都有不同于其他圖像的清晰部位,它們分別記錄了樣品不同部位的形貌和顏色信息),最后經過專用圖像處理軟件的分析、融合,最終得到一幅全清晰的高品質圖片。

3、立體合成

     光學系統受景深小的物理性能限制,對縱向變化范圍較大的物體,所拍圖片為局部清晰。利用景深擴展軟件,將序列圖像聚焦清晰的部分提取 ,并合并出一幅清晰、逼真、富有立體感的圖像。圖像合成過程不做額外的處理和變換,保證了最終圖像的真實性。

上海譜騫光學儀器有限公司(http://www.shshengstest.com)是國內一家顯微鏡(光機電)研發、營銷,售后服務為一體的專業光學設備儀器公司。并同時代理國外光學品牌儀器知名品牌,并保持 著良好的合作關系,公司有專業的銷售及售后服務團隊,能為用戶提供完善的解決案和系統的培訓。主營:金相顯微鏡生物顯微鏡體視顯微鏡倒置顯微鏡視頻顯微鏡、熒光顯微鏡、偏光顯微鏡等。

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