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普通光學顯微鏡拍攝小型昆蟲
發布時間:2020/11/17
通常觀察昆蟲的形態結構使用的是體視顯微鏡。 體視顯微鏡又稱實體顯微鏡,由于采用雙通道光路,雙目鏡筒中的左右兩光束具有一定的夾角,即體視角(一般為12 °-15°),因而能形成三維空間的立體圖像,具有立體感強、成像清晰寬闊(景深大)、長工作距離(通常為110mm,便于解剖操作)同時可連續放大觀看樣品。生物學上體視顯微鏡常用于解剖過程中的實時觀察。在觀察小型昆蟲(3mm以下,蟲體不透明)時,由 于解剖鏡放大倍率一般在8-100倍之間,常常無法看清昆蟲一些細微結構,而普通生物顯微鏡一般有多個鏡頭可更換,放大倍率50-1000倍左右,大大提高了分辨率。作者通過對普通光學顯微鏡的光路的改變,以及景深擴展軟件的配套應用,使利用普通光學顯微鏡就能拍攝到高清、立體小型昆蟲圖像的愿望成為現實。現將方法介紹如下:
1、改變光路
普通光學顯微鏡的光源一般設在載物臺下方的底座上,為透射光路l2 J,光從下方透射穿過觀察物進入物鏡,因此,普通光學顯微鏡的鏡檢對象必須是透明的,且制作成裝片后 方可放在載物臺上觀察。當鏡檢的對象不透明時,必須改變光路,關閉普通光學顯微鏡原有的光源,或用卡紙擋住普通光學顯微鏡原有的采光系統, 取而代之,在鏡檢對象上方添加新的照明光源。可以自 制小型冷陰極環形照明燈,通過旋鈕套扣在物鏡上,使光線從上方透射到鏡檢對象上,從而使不透明的鏡檢物也可以在普通光學顯微鏡上觀察。不足之處:(1)不能連續變倍觀察,需要通過更換物鏡鏡頭,方可改變放大倍率,此時,必須先將套扣在物鏡上外接光源卸下,才可以更換物鏡;(2)物鏡與鏡檢對象之間的距離很短(小于10mm),往往不便進行復雜的解剖操作。
2、分層拍攝
使用光學顯微鏡觀察昆蟲標本時,因昆蟲是立體的,往往都超出了顯微鏡的景深范圍(約1-100μm),這時獲取到的昆蟲圖片就只能是局部清晰的,該如何去解決呢?首先通過調節顯微鏡達到樣品的不同聚焦層面(這里注意調焦步距要小于景深,若大于景深就會有信息遺失),然后將所有這些層面的圖像用數碼成像設備拍攝并傳輸到計算機(這些層面圖像中的每一幅都有不同于其他圖像的清晰部位,它們分別記錄了樣品不同部位的形貌和顏色信息),最后經過專用圖像處理軟件的分析、融合,最終得到一幅全清晰的高品質圖片。
3、立體合成
光學系統受景深小的物理性能限制,對縱向變化范圍較大的物體,所拍圖片為局部清晰。利用景深擴展軟件,將序列圖像聚焦清晰的部分提取 ,并合并出一幅清晰、逼真、富有立體感的圖像。圖像合成過程不做額外的處理和變換,保證了最終圖像的真實性。
上海譜騫光學儀器有限公司(http://www.shshengstest.com)是國內一家顯微鏡(光機電)研發、營銷,售后服務為一體的專業光學設備儀器公司。并同時代理國外光學品牌儀器知名品牌,并保持 著良好的合作關系,公司有專業的銷售及售后服務團隊,能為用戶提供完善的解決案和系統的培訓。主營:金相顯微鏡、生物顯微鏡、體視顯微鏡、倒置顯微鏡、視頻顯微鏡、熒光顯微鏡、偏光顯微鏡等。
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