通常觀察昆蟲(chóng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)使用的是體視顯微鏡。 體視顯微鏡又稱實(shí)體顯微鏡，由于采用雙通道光路，雙目鏡筒中的左右兩光束具有一定的夾角，即體視角（一般為12 °-15°），因而能形成三維空間的立體圖像，具有立體感強(qiáng)、成像清晰寬闊(景深大)、長(zhǎng)工作距離(通常為110mm，便于解剖操作)同時(shí)可連續(xù)放大觀看樣品。生物學(xué)上體視顯微鏡常用于解剖過(guò)程中的實(shí)時(shí)觀察。在觀察小型昆蟲(chóng)(3mm以下，蟲(chóng)體不透明)時(shí)，由 于解剖鏡放大倍率一般在8-100倍之間，常常無(wú)法看清昆蟲(chóng)一些細(xì)微結(jié)構(gòu)，而普通生物顯微鏡一般有多個(gè)鏡頭可更換，放大倍率50-1000倍左右，大大提高了分辨率。作者通過(guò)對(duì)普通光學(xué)顯微鏡的光路的改變，以及景深擴(kuò)展軟件的配套應(yīng)用，使利用普通光學(xué)顯微鏡就能拍攝到高清、立體小型昆蟲(chóng)圖像的愿望成為現(xiàn)實(shí)。現(xiàn)將方法介紹如下：

1、改變光路

     普通光學(xué)顯微鏡的光源一般設(shè)在載物臺(tái)下方的底座上，為透射光路l2 J，光從下方透射穿過(guò)觀察物進(jìn)入物鏡，因此，普通光學(xué)顯微鏡的鏡檢對(duì)象必須是透明的，且制作成裝片后 方可放在載物臺(tái)上觀察。當(dāng)鏡檢的對(duì)象不透明時(shí)，必須改變光路，關(guān)閉普通光學(xué)顯微鏡原有的光源，或用卡紙擋住普通光學(xué)顯微鏡原有的采光系統(tǒng)， 取而代之，在鏡檢對(duì)象上方添加新的照明光源。可以自 制小型冷陰極環(huán)形照明燈，通過(guò)旋鈕套扣在物鏡上，使光線從上方透射到鏡檢對(duì)象上，從而使不透明的鏡檢物也可以在普通光學(xué)顯微鏡上觀察。不足之處：(1)不能連續(xù)變倍觀察，需要通過(guò)更換物鏡鏡頭，方可改變放大倍率，此時(shí)，必須先將套扣在物鏡上外接光源卸下，才可以更換物鏡；(2)物鏡與鏡檢對(duì)象之間的距離很短(小于10mm)，往往不便進(jìn)行復(fù)雜的解剖操作。

2、分層拍攝

     使用光學(xué)顯微鏡觀察昆蟲(chóng)標(biāo)本時(shí)，因昆蟲(chóng)是立體的，往往都超出了顯微鏡的景深范圍(約1-100μm)，這時(shí)獲取到的昆蟲(chóng)圖片就只能是局部清晰的，該如何去解決呢?首先通過(guò)調(diào)節(jié)顯微鏡達(dá)到樣品的不同聚焦層面(這里注意調(diào)焦步距要小于景深，若大于景深就會(huì)有信息遺失)，然后將所有這些層面的圖像用數(shù)碼成像設(shè)備拍攝并傳輸?shù)接?jì)算機(jī)(這些層面圖像中的每一幅都有不同于其他圖像的清晰部位，它們分別記錄了樣品不同部位的形貌和顏色信息)，最后經(jīng)過(guò)專用圖像處理軟件的分析、融合，最終得到一幅全清晰的高品質(zhì)圖片。

3、立體合成

     光學(xué)系統(tǒng)受景深小的物理性能限制，對(duì)縱向變化范圍較大的物體，所拍圖片為局部清晰。利用景深擴(kuò)展軟件，將序列圖像聚焦清晰的部分提取 ，并合并出一幅清晰、逼真、富有立體感的圖像。圖像合成過(guò)程不做額外的處理和變換，保證了最終圖像的真實(shí)性。

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