革蘭染色法

自然界存在多種多樣病菌，如何將這些病菌加以鑒別、分類，并選擇有效藥物進行治療這是很重要的問題。革蘭氏染色法，能夠把細菌分為兩大類：采用這種染色方法，是先用龍膽紫（亦稱結晶紫）來染病菌，所有細菌都染成了紫色，然后再涂以革蘭氏碘液，來加強染料與菌體的結合，再用95％的酒精來脫色20～30秒鐘，有些細菌不被脫色，仍保留紫色，有些細菌被脫色變成無色，最后再用復紅或沙黃復染1分鐘，結果已被脫色的細菌被染成紅色，未脫色的細菌仍然保持紫色，不再著色，這樣，凡被染成紫色的細菌稱為革蘭氏陽性菌(G﹢菌) 染成紅色的稱為革蘭氏陽性菌(G-菌) 革蘭氏染色法的意義就在于鑒別細菌，把眾多的細菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。大多數化膿性球菌都屬于革蘭氏陽性菌，它們能產生外毒素使人致病，而大多數腸道菌多屬于革蘭氏陰性菌，它們產生內毒素，靠內毒素使人致病。在治療上，大多數革蘭氏陽性菌都對青霉素敏感（結核桿菌對青霉素不敏感）；而革蘭氏陰性菌則對青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青霉素敏感），而對鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。

革蘭氏染色的結果取決于細菌細胞壁的結構即革蘭氏染色原理為

G﹢菌：細胞壁厚，肽聚糖網狀分子形成一種透性障，當乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上。呈紫色。

Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯松散，乙醇脫色不能使其結構收縮，其脂含量高,乙醇將脂溶解，縫隙加大，結晶紫-碘復合物溶出細胞壁，沙黃復染后呈紅色。

BL-160Z科研級三目攝像生物顯微鏡

革蘭氏染色反應

革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師Gram創立的。革蘭氏染色法（Gram stain）不僅能觀察到細菌的形態而且還可將所有細菌區分為兩大類：染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌，用G+表示；染色反應呈紅色(復染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌，用G-表示。

細菌對于革蘭氏染色的不同反應，是由于它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁較厚（20～80nm）主要是由肽聚糖和磷壁酸組成的，僅有一層結構，主要成分為肽聚糖，占細胞壁干重的50%～90%。在染色過程中，當用乙醇處理時，由于脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫-碘復合物被保留在細胞內而不易脫色，因此，呈現藍紫色；革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低，而脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫-碘復合物易被乙醇抽出而脫色，然后又被染上了復染液(番紅)的顏色，因此呈現紅色。

革蘭氏陽性細菌：金黃葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、利斯特菌……

革蘭氏陰性桿菌：克雷白桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、流感嗜血桿菌、沙門氏菌…