不同類別顯微鏡的介紹

在細菌的形態(tài)學(xué)檢查中以光學(xué)顯微鏡為常用，借助顯微鏡放大至1000倍左右可以觀察到細菌的一般形態(tài)和結(jié)構(gòu)，至于細菌內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)，則需經(jīng)電子顯微鏡放大數(shù)萬倍以上才能看清。檢查細菌常用的顯微鏡有以下幾種：

1. .電子顯微鏡：電子顯微鏡以電子流代替光源，其波長極短（約為0.005nm），分辨能力大大提高，電磁圈代替普通顯微鏡的光學(xué)放大系統(tǒng)，放大倍數(shù)可達數(shù)萬至數(shù)十萬倍，能分辨lnm的物體，細菌的表面形態(tài)和內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)均能清楚地顯現(xiàn).電子顯微鏡有透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡。前者適于觀察細菌內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)，后者適于對細菌表面結(jié)構(gòu)及附件的觀察。用電子顯微鏡觀察，標(biāo)本需經(jīng)特殊制片，在干燥真空的狀態(tài)下檢查，不能觀察到活的微生物。

2.暗視野顯微鏡：暗視野顯微鏡是用特制的暗視野集光器代替普通光學(xué)顯微鏡上的明視野集光器，由于暗視野集光器的中央為不透光的遮光板，光線不能直接射入鏡筒，故背景視野黑暗無光，而從集光器四周邊緣斜射到標(biāo)本部位的光線，經(jīng)菌體散射后而進入物鏡。故在強光的照射下，可以在黑暗的背景中看到發(fā)亮的菌體，猶如夜空中的明亮星星。明暗反差提高了觀察的效果，多用于檢查不染色的活細菌和螺旋體的形態(tài)及運動觀察醫(yī)學(xué)。

3.相差顯微鏡：在進行未染色標(biāo)本檢查時，由于細菌的折旋光性與周圍環(huán)境的折旋光性相近，明暗對比不明顯。在普通光學(xué)顯微鏡下不易看清，用暗視野顯微鏡只能看到發(fā)亮的菌體輪廓，看不清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。而相差顯微鏡依據(jù)光波穿過標(biāo)本中密度不同的部位時，引起光相差異的原理，利用相差板的光柵作用，改變直射光的光相和振幅，將光相的差異轉(zhuǎn)換成光的強度的差異，使細菌中的某部分結(jié)構(gòu)比其他部分深暗，襯托出鮮明的對比。本法主要用于檢查不染色活細菌的形態(tài)及某些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

4.熒光顯微鏡：熒光顯微鏡以紫外光或藍紫光為光源，能激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)光使之成為可見光。細菌經(jīng)熒光色素染色后，置于熒光顯微鏡下，即可激發(fā)熒光，因此在暗色的背景下可以看到發(fā)射熒光的細菌。由于紫外光與藍紫光的波長較短（0.3～0.4μm），故分辨率得到進一步提高。熒光顯微鏡還廣泛應(yīng)用于免疫熒光技術(shù)中醫(yī)學(xué)。

5.普通光學(xué)顯微鏡：普通光學(xué)顯微鏡通常以自然光或燈光為光源，其波長約0.5μm.在最佳條件下，顯微鏡的最大分辨率為波長的一半，即0.25μm，而肉眼所能看到的最小形象為0.2mm，故在普通光學(xué)顯微鏡下用油鏡放大1000倍，可將0.25μm的微粒放大到0.25mm，肉眼便可以看清，一般細菌大于0.25μm，故用普通光學(xué)顯微鏡均能清楚看到。