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倒置顯微鏡如何正確使用呢
發布時間:2019/12/3
倒置顯微鏡是用于生物科學研究領域的多功能顯微鏡,其結構復雜且價格昂貴,因此,要想醫學研究生正確掌握倒置顯微鏡的操作使用規范,教師得首先在示范倒置顯微鏡的實際操作之前,開設學習倒置顯微鏡基本知識的課程,介紹倒置顯微鏡的結構、原理、功能和基本使用方法,再在具體的使用操作中,針對不同的標本,示范不同的功能,由淺入深,逐漸使醫學研究生對倒置顯微鏡的操作使用規范化。
1.明視野觀察的正確使用。倒置顯微鏡的功能之一是明視野觀察,其基本原理是標本經光線照射后,各部分對光吸收的不同而在明亮的背景中實現成像,主要適用于經染色或本身具有顏色的細胞、組織切片等標本的觀察。
2.相差觀察的正確使用。倒置顯微鏡的功能之二是相差觀察,其基本原理是將樣本不同部分的光程差轉變為振幅差,經過帶有相位片的相差物鏡和帶有環狀光闌的聚光鏡實現觀測,主要適用于活細胞或不染色的組織切片觀察,在實驗教學過程中,除了正確引導醫學研究生遵守相差觀察的基本操作方法,同時更為重要的是引導他們對使用相差觀察的標本認識和掌握。對他們來說,在日后的科學研究中,為常用的是培養細胞的顯微觀察。首先,對于細胞器材的選擇,一般建議使用玻璃材質和塑料材質的培養皿、培養板和培養瓶。它們多為無色透明,可直接在倒置顯微鏡上進行觀察,不用倒掉細胞液和經過其他處理。其次,在進行顯微觀察中,不要隨意打開器材的蓋子,以免污染細胞后,對于操作人員來說,需佩戴手套、口罩和白大衣,不僅可以保護自身健康而且可以防止細胞污染。
3.觀察的正確使用。倒置顯微鏡的功能之三是觀察,其基本原理是利用激發光激發樣本產生,從而實現樣本的形狀與定位觀察,主要適用于標記樣本的觀察。觀察是倒置顯微鏡的重要功能,其配件昂貴且使用特殊。要想醫學研究生正確地掌握觀察的操作使用規范,教師除了教會他們掌握基本的操作方法,同時更為重要的是教會他們掌握它的特殊性。首先,在標本制作中,載玻片和蓋玻片應表面光潔且厚度適宜(載玻片在0.8mm~1.2mm之間,蓋玻片在0.17mm左右);標本應厚度適宜,同時避免細胞重疊或雜質掩蓋;封裱劑應使用甘油和碳酸鹽緩沖液(0.5mol/LPH9.0~9.5)的等量混合液。其次,在觀察前,應關閉房間內的電燈和倒置顯微鏡的白光,確保處于暗室環境。后,在觀察中,應嚴格控制觀察時間,一般以1~2小時/次為宜,否則會出現衰減和消失的現象;調整光源時應佩戴防護眼鏡,避免紫外線對眼鏡的傷害。
4.圖像拍攝的正確使用。在科學研究中,不僅要求倒置顯微鏡可以實現多種觀察,而且要求倒置顯微鏡可以實現圖像拍攝。倒置顯微鏡系統通過光電轉換將光學顯微鏡與計算機結合在一起,不僅可以在目鏡上進行顯微觀察,而且可以在計算機上進行實時動態圖像的觀察、編輯和保存。
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